DC细胞培养及分化

树突状细胞（Dendritic Cells，DC）广泛分布于血液、肝、脾、淋巴结及其他非免疫器官组织中，是目前已知递呈功能最强的抗原呈递细胞（Antigen-presenting cells, APC），也是仅有能刺激初始T细胞反应的APC，在免疫反应中起着关键的引导和调节作用。但DC在机体内分布散，含量少，在外周血中比例还不到白细胞的1%，从体内分离DC不仅费时费力，而且得到的数量很少，所以体外扩增成为DC研究和应用的必经之路。 DC经体外大量扩增培养、肿瘤抗原致敏后，回输给患者，可促进患者T细胞增殖分化为细胞毒性T细胞、同时激活B淋巴细胞，全程启动抗体免疫系统产生高效而特意的抗肿瘤效应。

DC体外扩增方法

目前DC主要是用细胞因子从骨髓、外周血和脐带血的DC前体细胞定向诱导、分化并扩增而得。骨髓和脐带血的采集不方便，大规模应用受到限制，外周血由于取材简单，不需要复杂的筛选和纯化过程，所用细胞因子组合少，故为大多数研究人员采用，并已逐渐形成了相对固定的培养模式，是目前获得DC的较好途径。

DC的分化发育是在细胞因子组合的环境中完成的，DC的前体细胞在不同微环境、不同细胞刺激因子和不同诱导分化途径中，可分化为成熟度各异的细胞亚群。研究发现，髓样DC(myeloid dendritic cell，MDC)，也称DC1，与单核细胞和粒细胞有共同的前体细胞，DC1在经GM-CSF、IL-4体系培养后往往只能生成不成熟的DC，需要附加其他炎症因子如TNF-α、IFN-β、IFN-γ、IL-6及PGE2等，才可以产生成熟的DC。

而常规的DC诱导培养中GM-CSF、IL-4和TNF-α，被认为是最重要的3大细胞因子，其中GM-CSF促成DC生成、IL-4作用是抑制DC前体细胞向CD14+巨噬细胞分化，而是分化为CD14-/CD1a-未成熟DC；而加入TNF-α后，DC前体细胞即向成熟表型CD1a+/CD83+ DC分化。

淋巴样DC(Lymophiod dendritic cells，LDC)或浆细胞样DC(plasmacytoid DC，pDC)，即DC2，与T细胞和NK细胞有共同的前体细胞。LDC经GM-CSF、IL-4可以直接诱导出具有成熟表型的DC，另外，FLT-3配体作为一种能够刺激早期造血的细胞因子，可以调节最原始的造血干/祖细胞的增殖和分化，与GM-CSF、IL-4、TNF-α及IFN-γ联合应用，可促进来自骨髓的CD34+祖细胞分化、发育产生DC。

图  DC细胞培养&分化

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附

表  CHAMOT相关细胞因子生物活性数据